해석

임상 성능

1) 미국에서의 임상평가 RADI COVID-19 Ag Rapid Test의 임상 성능은 VTM에 있는 익명의 양성 비인두 면봉 검체 111개와 익명의 비인두 면봉 음성 검체 120개를 사용하여 미국에서 분자 및 혈청학적 진단 인증을 모두 취득한 복잡한 실험실에서 검증하였고, 그 결과는 FDA가 부여한 긴급사용승인(EUA)을 통해 DTPM COVID-19 RT PCR 검사(Comparator법)로 확인되었다.

사용 후 남은 익명의 검체의 Ct 값은 15.081 ~ 33.696였고, EUA 승인 DTPM 분자 RT-qPCR 분석의 컷오프 값은 35 사이클이다.

그 결과 RADI COVID-19 Ag Rapid Test는 comparator법(DTPM COVID-19 RT PCR 검사)의 판정 기준치(cut-off)로 35사이클 미만의 Ct 값을 사용했을 때 비인두 검체에 대해 100% 특이도와 97.3% 민감도를 보였다.

임상 성능		DTPM COVID- 19 RT PCR 검사 (Comparator 법)
		양성	음성	합계
RADI COVID-19 신속 항원 검사	양성	108	0	108
	음성	3	120	123
	합계	111	120	231
	민감도	97.30% (95 CI (%): 92.4 to 99.1%)
	특이도	100% (95 CI (%): 96.9 to 100%)
총 일치율		98.70%

2) 가나에서의 임상 평가 The RADI COVID-19 Ag Rapid Test Kit는 2021년 2월 8일 가나 대학교 NMIMR(Noguchi Memorial Institute for Medical Research)이 평가하였다.

일상적인 진단 후 남은 비인두 임상 검체는 등록해 두었다. (검체 채취 기간: 2021년 1월 ~ 2월). comparator법으로서 세계보건기구 긴급사용목록(EUL)에 포함된 제품인 Q-PCR(Detection kit for 2019-nCoV RNA (PCR Fluorescence Probing))에 의해 확인된 Ct 값이 다른 39개의 SARS Cov-2 양성 검체와 55개의 SARS Cov-2 음성 검체로 구성된 총 94개의 비인두 임상 검체를 VTM에서 선정하였다.

Q-PCR 분석의 판정기준값(cut-off value)은 40사클이다. 양성 검체에 대한 Ct 값의 범위는 15.41~23.62(ORF1ab 유전자) 및 14.2~25.96(N 유전자)이었다. RADI COVID-19 신속 항원 검사에 대한 평가는 블라인드 방식(blinded fashion)으로 수행되었다. RADI COVID-19 신속 항원 검사의 성능을 비교체법(Comparator method)과 비교하여 아래와 같이 나타내었다.

임상 성능ㅇ		2019-nCoV RNA 검출 키트(PCR Fluorescence Probing) (WHO EUL 검사)
		양성	음성	Total
RADI COVID-19 신속 항원 검사	양성	37	3	40
	음성	2	52	54
	합계	39	55	94
	민감도	94.9% (95%CI : 83.1 to 98.6)
	특이도	94.6% (95%CI : 85.1 to 98.1)

3) 카메룬에서의 임상 평가 RADI COVID-19 Ag Rapid Test 키트는 2021년 2월 1일부터 3월 31일까지 카메룬 야운데(Yaoundé)에 있는 Epicenter(Médecins Sans Frontières 연구 부서)가 증상이 있는 환자로부터 증상 발현 시점부터 시간에 따라 무차별적으로 채취한 새 검체를 사용하여 평가하였다.

RT-PCR(Abbott RT-PCR)로 확인된 다양한 Ct 값을 가진 33개의 SARS-CoV-2 양성 검체와 94개의 SARS-CoV-2 음성 검체로 구성된 총 127개의 새 비인두 검체가 사용되었다. 모든 검체는 증상 발현 후 5일 이내에 채취하였다.
RADI COVID-19 신속 항원 검사의 성능을 비교체법(Comparator method)과 비교하여 아래와 같이 나타내었다.

		Abbott RT-PCR (USFDA EUA test)
		양성	음성	합계
RADI COVID-19 신속 항원 검사	양성	28	2	30
	음성	5	92	97
	합계	33	94	127
	민감도	84.8% (95% CI 69.1 to 93.3%)
	특이도	97.9% (95% CI 92.6 to 99.4%)

분석 민감도 _ 최소 검출 한계(LOD)

RADI COVID-19 Ag Rapid Test는 음성 비인두 임상 매트릭스에서 열 불활성화 SARS-CoV-2 분리물의 연속 희석 농도를 사용하여 두 가지 다른 방법(VTM법/직접 면봉법)으로 최소 검출 한계를 설정했다. (사용 물질 출처: Hong Kong/VM20001061/2020, 농도: 1.15 x 10⁷ TCID₅₀/mL, 제조사: Zeptometrix).

1) VTM법: 가열 불활성화 바이러스(heat inactivated virus)를 VTM에서 음성 임상 매트릭스로 희석하여 여러 가지의 바이러스 희석 농도를 만들었다(초기 시험 농도: 1.15 x 10⁷ TCID⁵⁰/mL).

2) 직접 면봉법: 면봉에 가열 불활성화 바이러스 30ul를 첨가하여 음성 임상 매트릭스로 희석(초기 시험 농도: 9.86 x10⁵ TCID₅₀/mL)하였다.

각 방법 별 검사는 해당 사용 설명서에 따라 실시하였다. VTM법과 직접 면봉법 모두에 대해 서로 다른 바이러스 희석 농도에서 잠정적으로 확인된 LoD가 설정되면 각 방법의 최종 LoD는 제품이 20회 반복에서 95%(19/20) 이상의 확률로 검출될 수 있는 가장 낮은 바이러스 농도 수준에서 결정되었다.

방법	LoD
VTM법	1.43 x103 TCID50/mL
직접 면봉법	9.86 x101 TCID50/mL (≒2.96 x100 TCID50/Swab)

교차 반응성 및 미생물 간섭

FDA EUA 지침을 따르는 총 35종의 미생물 가운데 30종은 습식 검사를 통해, 나머지 5종은 in-silico 분석을 통해 평가하였다. 연구에서 교차 반응이나 간섭은 관찰되지 않았다.

습식 검사

• NO.	병원체
  1	코로나바이러스(변종: 229E)
  2	코로나바이러스(변종: OC43)
  3	코로나바이러스(변종: NL63)
  4	MERS 코로나바이러스
  5	아데노바이러스
  6	인플루엔자 A형(H1N1)
  7	인플루엔자 A형(H3N2)
  8	인플루엔자 B
  9	인간 메타뉴모바이러스(hMPV)
  10	파라인플루엔자 바이러스 1형
  11	파라인플루엔자 바이러스 2형
  12	파라인플루엔자 바이러스 3형
  13	파라인플루엔자 바이러스 4형
  14	라이노바이러스
  15	호흡기 세포융합 바이러스(A형)
  16	호흡기 세포융합 바이러스(B형)

• NO.	병원체
  17	SARS 코로나바이러스
  18	엔트로바이러스 A
  19	엔트로바이러스 B
  20	엔트로바이러스 C
  21	엔트로바이러스 D
  22	헤모필루스 인플루엔자
  23	폐렴구균
  24	화농성 연쇄상구균
  25	칸디다 알비칸스
  26	백일해균
  27	레지오넬라 뉴모필라
  28	황색포도상구균
  29	표피포도상구균
  30	수거한 인간 비강 세척물 – 대표적인 일반 호흡기 미생물군

in-silico 분석

• NO.	병원체
  31	마이코플라스마 폐렴균 1
  32	클라미디아 폐렴균 1
  33	결핵균 1

• NO.	병원체
  34	폐포자충(PJP) 1
  35	인간 코로나바이러스 HKU1 2

¹유의미한 유사성이 발견되지 않았다. 상동성 기반 교차 반응성은 배제할 수 있다.
²비교 분석 결과 서열의 82%에 걸쳐 23%의 상동성이 나타났다. 인간 코로나바이러스 HKU1의 교차 반응 가능성을 배제할 수 없다.

간섭

RADI COVID-19 신속 항원 검사를 SARS-CoV-2(3X LoD)가 존재 또는 부존재할 때 음성의 임상 매트릭스(clinical matrix)에서 간섭을 일으킬 가능성이 있는 20가지의 내인성 또는 외인성 물질로 실시하였다. 연구 결과 간섭은 나타나지 않았다.

NO.	물질	유효 성분	농도
1	내인성	뮤신	0.5 %
2	내인성	전혈(全血)	4 %
3	비강 분무액	크로몰린	15 %
4	비강 점적	비강 점적	15 %
5	비강 젤	염화나트륨	5 %
6	호흡기 검체	비오틴	100 ug/ml
7	항생 물질	클로람페니콜	100 mg/dL
8	항염증제	아세트아미노펜	10 mg/ml
9	인후함당정제	벤조카인	1.5 mg/ml
10	항바이러스제	오셀타미비르 인산염	5 mg/ml
11	항생제, 비강 연고	무피로신	10 mg/ml
12	항균제, 전신	토브라마이신	4 ug/ml
13	토브라마이신	덱사메타손	1 mg/ml
14	내인성	옥시메타졸린	15 %
15	내인성	플루티카손 프로피오네이트	5 %
16	내인성	멘톨	1.5 mg/ml
17	Naso GEL (NeilMed)*	탄산수소나트륨	5%
18	Zicam*	아세트산아연	5 %
19	유사요법제(Alkalol)*	유칼리프톨	1:10 희석
20	인후염 페놀 스프레이*	페놀	15 %(v/v)

* : "*"가 표시된 물질의 경우, 상용 브랜드 제품을 확보하기가 어려웠기 때문에 해당 제품의 주성분을 고려하여 잠재적인 간섭 가능성에 대한 검사를 수행했다.